imgimg
imgimg
资讯动态
/
/
/
芽孢杆菌厂家:枯草芽孢杆菌原生质体制备工艺

芽孢杆菌厂家:枯草芽孢杆菌原生质体制备工艺

  • 分类:行业资讯
  • 作者:
  • 来源:
  • 发布时间:2021-06-05 12:33

芽孢杆菌厂家:枯草芽孢杆菌原生质体制备工艺

  • 分类:行业资讯
  • 作者:
  • 来源:
  • 发布时间:2021-06-05 12:33
  • 访问量:0

1.培养枯草芽孢杆菌:取亲本菌株T4412和TT2的新鲜斜面,放入装有液体完全培养基(CM)的试管中,36振荡培养14小时,将每株菌的1毫升菌液转移到装有20毫升液体完全培养基的250毫升锥形瓶中,36振荡培养3小时,使细胞生长到对数前期,加入25u/毫升青霉素,使其浓度为0.3u/。枯草芽孢杆菌厂家

枯草芽孢杆菌原生质体制备工艺

2.收集细胞:取10毫升菌液,以4000转/分钟离心10分钟,弃去上清液,将枯草芽孢杆菌细菌悬浮于磷酸盐缓冲液中,离心。用这种方法洗两次,将细菌悬浮在10毫升的水中,每毫升含有约108,109个活细菌。枯草芽孢杆菌厂家

3.细菌总数的测定:每份取0.5毫升细菌溶液,枯草芽孢杆菌用生理盐水稀释,取1毫升10-5、10-6和10-7(每次稀释用两个平板),倒入完整的培养基,培养36小时后计数。这是未经酶处理的细菌总数。枯草芽孢杆菌厂家

4.分离壁:枯草芽孢杆菌从两个亲本菌株中取出5mL菌悬液,加入浓度为100微克/毫升的5mL溶菌酶溶液,混合均匀,在36个水浴中保温30分钟,定期取样,通过显微镜检查观察原生质体的形成,当95%以上的细胞变成球形原生质体时,以4000转/分钟离心10分钟,弃去上清。枯草芽孢杆菌厂家

5.剩余菌数的测定:取原生质体悬液0.5mL,用无菌水稀释,枯草芽孢杆菌使原生质体裂死。取0.1毫升10-2、10-3和10-4稀释液,铺在完整的培养基平板上,培养2448小时。生长的菌落应该是未被酶裂解的剩余细胞。计算酶处理后的剩余细胞数,并分别计算两亲本菌株的原生质体形成率。原生质体形成率:未经酶处理的细菌总数——酶处理后剩余细胞数。枯草芽孢杆菌厂家


相关推荐文章

购物车浮动框

noGoods
购物车中还没有商品,赶紧选购吧!

Copyright © 沧州新大地生物科技有限公司  All Rights Reserved     冀ICP备15007116号-1     网站建设:中企动力  石家庄

沧州新大地生物科技有限公司